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【储存条件】
长期保存，请置于-20˚C，有效期24个月。经常使用，可置于4°C保存至少六个月。
【产品简介】
本产品是从高度耐热菌Thermus aquaticus 中克隆其DNA聚合酶基因，原核表达后经柱层析纯化获得的超纯、高效、耐热DNA聚合酶，SDS-PAGE 显示为一条94kD的蛋白条带。该酶除具有5’-3’DNA 聚合活性外，还具有少量的5’-3’DNA 外切活性，但不具有3’-5’DNA外切活性（校读活性），适用于常规PCR扩增。M5 Taq DNA Polymerase 扩增得到的 PCR 产物含有 3’-A 碱基，可直接用于 TA 克隆(聚合美TOPO-TA克隆载体货号：MF019或MF020)。
【产品组份】
MF041-01 MF041-05 MF041-10 MF041-F(定制)
M5 Taq DNA Polymerase (5 U/µl) 100 μl 5x100 μl 10x100 μl 5x400ul
10x M5 Taq PCR Buffer 1ml 5x1ml 10x1ml 5x5ml
【活性定义】
用活性化的大马哈鱼精子 DNA 作为模板/引物，在74℃、30分钟内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物所需的酶量定义为 1 个活性单位（U）。
【适用范围】
1. 基因检测：本产品不同批次之间误差很小，特别适合大规模基因检测、半定量PCR实验和微量DNA的检测。
2. 用于从复杂模板中如基因组等扩增PCR产物，如表达基因的克隆、基因的定点突变和细胞内基因点突变的分析（SNP）等。
【所需试剂】使用者需准备PCR反应的模板、引物、dNTPs和蒸馏水等。
【操作示例】 | |
按下表配制PCR反应体系（冰上操作）: | |
Template DNA* | <1µg |
10× M5 Taq PCR Buffer | 2.5 μl |
10mM dNTPs | 0.5 µl |
Primer 1 (10 μM) | 0.5 µl |
Primer 2 (10 μM) | 0.5 µl |
M5 Taq DNA Polymerase(5U/µl) | 0.5 µl |
ddH2O补足至 | 25 µl |
建议的PCR条件： | |
95°C | 3 min. |
32-36 cycles of: | |
94°C | 25 sec. |
55–64°C | 25 sec. |
72°C | 30sec.-1min./1kb DNA |
72°C | 5 min. |
保持 4°C forever |
<*模板量：10~1000 ng 基因组 DNA，1~30 ng 质粒，或 1~2 μl RT-PCR 反应后的 cDNA。以上举例为常规 PCR 反应系统，仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异，需根据模板、引物、目的片段的特点设定最佳反应条件，并根据比例放大或缩小反应体系>。
电泳结果检测：取2 μl反应液，添加上样缓冲液，电泳观察结果。