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【产品简介】
本产品包含Super FastTaq聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应的增强剂和优化剂以及稳定剂，浓度为2x。适用于超快PCR反应（延伸速度可以达到5-10秒/kb，最短半小时完成PCR）、复杂模板如GC含量高（>60%），有二级结构等的扩增和大规模基因检测。短片段或者简单模板如质粒模板可以尝试5秒/kb延伸速度并采用较少循环数以进一步缩短PCR时间；长片段(≥3kb)或者复杂模板产量较低时可以采用15-20秒/kb延伸速度或者采用较多循环数。本产品使用方便快捷，能避免PCR操作过程中的污染，使用时只需取适量2x M5 Super FastTaq PCR MasterMix溶液，加入模板和引物，并加入去离子水补足体积，使MasterMix溶液的浓度为1×即可进行反应。产品已经加入染料（为红色），反应完成后，产物可直接电泳。PCR产物带A，胶回收后与TOPO-TA载体（Mei5bio, MF019或者MF020）连接。
【产品组份】
MF164-01 MF164-05 MF164-10
2× M5 Super FastTaq PCR MasterMix 1ml 5x1ml 10x1ml
ddH2O 1ml 5ml 2x5ml
【适用范围】
1) 基因检测：本产品不同批次之间误差很小，特别适合大规模基因检测，半定量PCR实验和微量DNA的检测。
2) 超快PCR扩增：如表达基因的克隆、细胞内基因点突变的分析（SNP）等。
3）PCR产物带A，胶回收后与TOPO-TA载体（Mei5bio, MF019或者MF020）连接。
【所需试剂】使用者仅需准备PCR反应的模板、引物和蒸馏水等。
【操作示例】 | |
按下表配制PCR反应体系（冰上操作）: | |
Template DNA* | <1µg |
2× M5 Super FastTaq PCR MasterMix | 10 μl |
Primer 1 (10 μM) | 0.5 µl |
Primer 2 (10 μM) | 0.5 µl |
ddH2O补足至 | 20 µl |
建议的PCR条件： | |
95°C | 2-3 min. |
30-36 cycles of: | |
94°C | 10 sec. |
55–64°C | 10-15 sec. |
72°C | 5-10 sec./1kb DNA |
72°C | 1-5 min. |
4°C | forever |
<*模板量：10~1000 ng 基因组 DNA，1~30 ng 质粒，或 1~2 μl RT-PCR 反应后的 cDNA。以上举例为常规 PCR 反应系统，仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异，需根据模板、引物、目的片段的特点设定最佳反应条件，并根据比例放大或缩小反应体系>。