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2X M5 HiPer Dual SYBRgreen Realtime PCR Super mix(双封闭法,Rox预混)
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2X Dual SYBRgreen Realtime PCR Super Mix

(双封闭法,Rox预混)使用说明书


品名单位货号
2X Dual SYBRgreen RealtimePCR Super Mix1mL*5MF013-plus-01
2X Dual SYBRgreen RealtimePCR Super Mix1mL*5)x5MF013-plus-05
2X Dual SYBRgreen RealtimePCR Super Mix1mL*5)x10MF013-plus-10



储存条件

长期保存,请置于-20˚C,有效期24个月。经常使用,可置于4˚C保存至少六个月。

产品简介

本产品是采用SYBR Green I嵌合荧光法进行实时荧光定量PCR的专用2×浓度预混液。利用聚合美特异的新型双封闭HotStart Taq DNA Polymerase抑制在常温下Taq酶的聚合酶活性,从而抑制在低温条件下出现的由引物和模板DNA非特异性杂交或引物二聚体引起的非特异性扩增。特异的双阳离子缓冲液,增强特异性,减少引物二聚体的形成,使得结果更加准确可靠。优化浓度的SYBR Green I 荧光染料,特异性地掺入DNA双链后,荧光信号增强,而不掺入链中SYBR Green I染料分子荧光信号不变,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步,荧光可以在退火或延伸阶段测定。

产品组份

新型双封闭HotStart Taq DNA PolymeraseSYBR Green IdNTPsMg2+ROX、反应缓冲液、稳定剂和增强剂。

适用范围

主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后cDNA靶序列的定量检测。本品具有高通用性,可用于各种仪器。因产品中已经添加了ROX Reference Dye,因此可以用于需要校正荧光信号的仪器(如ABI Prism7000/7300/7700/7900HTABI Step One /ABI Step One Plus荧光定量PCR仪)。也可以用于Roche LightCycler等各种荧光定量PCR仪上采用SYBRGreen法进行基因表达分析和核酸检测等实验。

所需试剂

本产品为2×预混荧光定量PCR反应体系,使用时只需加入模板、引物和水,使其工作浓度为1×,即可进行反应。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可最大限度地减少人为误差、节约PCR实验操作时间、降低污染几率。


操作示例

按下表配制PCR反应体系:

Template DNA  

X* µl

2X Dual SYBRgreen Realtime PCR Super Mix                       

10 μl

Primer 1 (10μM)                     

0.5 µl

Primer 2 (10μM)                     

0.5 µl

ddH2O补足至

20 µl

建议的PCR条件:


95°C

30-60 sec.

35-40 cycles of:


95°C

15 sec.

55–65°C

15 sec.

72°C

30-60 sec*.

*一般情况下目标片段在300bp以下时,延伸时间30秒即可,但一部分仪器,为测定稳定的荧光,延伸时间需要大于30秒。扩增曲线散乱,或者各孔间差异较大时,请设定较长的延伸时间(45-60秒)。

*:10~100 ng基因组 DNA ,或1~10 ng cDNA为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定最佳的模板使用量。另外two Step RT PCR反应的 cDNA RT 反应液)作为模板时的添加量不要超过PCR反应液总体积的10%

【注意事项】

  1. 使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。

2. 尽可能减少在光下的曝露时间,长时间的曝光可导致荧光信号强度的丧失。本品不能用于杂交探针法。


货号
MF013-plus
品牌
聚合美
市场价
13200.00
价格
1680.00
销量
99
储藏方法
长期保存,请置于-20˚C,有效期24个月。经常使用,可置于4˚C保存至少六个月
库存量
999
规格
(5x1ml) x10
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