科拜商城产品中心

M5 HiPer 多糖多酚植物基因组 DNA

提取试剂盒(磁珠法）使用说明书

【储存条件】

该试剂盒可在常温避光条件下稳定存放 1 年，组分分别保存（STP和磁珠需4℃保存，RNase A保存-20℃）。

【产品组成】

【注意事项】

1、溶液 TL 和 STP 在低温下可能形成沉淀，如有沉淀，请65℃加热孵育直至沉淀溶解再使用，DP1需避光保存。

2、一定不要超过最大实验材料推荐量，可适当低于该推荐量使用。

3、STP和磁珠需4℃保存，磁珠使用前需要室温孵育5-10min，RNaseA保存-20℃

【产品简介】

该产品可以轻松获得高纯度植物基因组代谢物等植物组织样品，提取的 DNA 序、 PCR 扩增、基因分型、southern

DNA。此磁珠提取法适用于多数植物 的基因组 DNA 提取，包括富含高糖、高纯 度高、完整性好，所得产物可用于多种分子生物学下游操作，如：高通量测等实验。

本试剂盒单次可提取高达 60mg 新鲜/冻存样品（或20mg 干样品），植物样品 研磨成粉，加入裂解液TL 和 RnaseA 在 60℃条件下裂解细胞，加入磁珠吸附核酸 经过乙醇清洗后，最后洗脱得到纯净的核酸产物。

【自备试剂】

磁力架、无水乙醇、80%乙醇

【起始样本量】

本试剂盒单次可处理最多不多于 60mg 的新鲜或冻存样品，或者最多 20mg 的干燥植物样品。试验时为保障产物纯度，起始样品可适当低于最大推荐量，特别在处理一些多糖多酚类物质含量多的样品时样品量更要适当降低，如果需要获得大量的基因组 DNA，或者样本中DNA 含量比较低，可以增加 TL 的用量，并 等比增加其他试剂的用量。

【操作步骤】

1、取 20mg 植物叶片组织（杵碎）转移至 1.5ml PCR 管中，加 100μl 的 TL 溶 液，加 2μl RNaseA 混匀后于 60℃水浴 30min，中间

适当混匀 2-3 次，晾至室温待用。

2、取 10μl 磁珠，置于磁力架上静止 2min，小心吸弃上清液，加 40μl STP 溶液（可以在 4℃预冷效果更佳），重悬磁珠，加入上一步裂解好的样品中，混匀，产生沉淀。

3、置于磁力架，静置 2min，吸取上清液（丢弃磁珠及沉淀物）置于新的 1.5ml 离心管中，加 200μl 无水乙醇混匀，静止 2min，然后加 10μl 磁珠混匀，静止 2min，置于磁力架上 2min，吸弃上清液。

4、加入 100μl DP1 溶液，室温颠倒混匀 2min，置于磁力架上 2min，吸弃上清。

5、再向磁珠中加入 200μl 80%乙醇，静置 30s 后，吸弃乙醇，再重复使用 200μl 80% 乙醇清洗一次，静置 30s 后，尽可能吸弃液体。

6、室温放置 5min，晾干（磁珠不反光）。

7、加 20μl EB 洗脱液，室温混匀后，70℃水浴 5-10min 增加产量，放置磁 力架上静置 2min，转移洗脱液至新管。

8、取 1μl 样品进行测量 OD 值，取 50ng DNA 样品做琼脂糖凝胶电泳检测， 使用 150V，20min,电泳条件。